Implantación de tejidos e inducción de estructuras callogénicas, a partir de explantes obtenidos de plántulas ex vitro de Cinchona officinalis L.

Abstract

Cinchona officinalis L, es una especie nativa de la provincia de Loja distribuyéndose en un rango altitudinal desde los 700 hasta los 2,900 m s.n.m. Desde su descubrimiento ha sido ampliamente utilizada en el ámbito medicinal debido a su alto contenido de alcaloides en la corteza, provocando que la especie sea objeto de sobreexplotación, esto acompañado de que la especie presenta una baja tasa de propagación; lo cual, conlleva a que en la actualidad las poblaciones naturales se encuentren reducidas a relictos boscosos y árboles aislados en potreros. Por lo tanto, el presente estudio tiene como objetivo la implantación de tejidos provenientes del invernadero e inducción de estructuras callogénicas de explantes ex vitro e in vitro de Cinchona officinalis L. Para ello, se recolectaron explantes de hojas de plántulas de invernadero (ex vitro), los cuales fueron previamente tratados con fungicida-bactericida y luego trasladados al laboratorio de Micropropagación Vegetal de la Universidad Nacional de Loja. Estos explantes fueron desinfectados con hipoclorito de sodio (NaClO) en diferentes concentraciones (10, 15, 20 y 25 %) durante 10 minutos. Posteriormente, fueron inoculados en medio de cultivo basal de Murashige y Skoog (MS, 1962) suplementado con vitaminas (tiamina, mio-inositol, piridoxina, ácido nicotínico, sacarosa, agar, ácido ascórbico, ácido cítrico y cisteína), así como concentraciones hormonales de ANA (5 y 10 mg/L) y KIN (0,5 mg/L) en condiciones de oscuridad. Durante los 45 días de evaluación, los explantes ex vitro registraron el 31 % de contaminación y un 55 % de fenolización posterior a los 10 días de inoculación; por lo cual, el material ex vitro no fue suficiente para el ensayo de formación de estructuras callogénicas y se tomó la decisión de utilizar material in vitro. Además, la formación de estructuras callogénicas en explantes in vitro fue del 71,33 % con promedio de 24 raíces por explante; y, para explantes ex vitro fue del 26,67 % de formación de callos con 13 raíces en promedio. Finalmente, en la fase de desinfección de explantes ex vitro de Cinchona officinalis L., el tratamiento 3 con 20 % de NaClO demostró un control efectivo sobre la contaminación, considerando su optimización durante la fase inicial en la implantación de tejidos. Sin embargo, respecto a la formación de estructuras callogénicas en explantes ex vitro y en explantes in vitro la combinación de auxinas y citoquinas con la que se obtuvo mayor porcentaje fue la combinación de 10 mg/L de ANA y 0,5 mg/L de KIN durante 90 días de evaluación.